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    Seaphages宿主細(xì)菌簡(jiǎn)介

    發(fā)布時(shí)間: 2022-09-16  點(diǎn)擊次數(shù): 853次

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    Seaphages

     

    宿主細(xì)菌

    擁有800 多個(gè)已測(cè)序的分枝桿菌噬菌體,我們熱衷于擴(kuò)大我們的網(wǎng)絡(luò),將在放線菌門(mén)內(nèi)其他宿主上分離的噬菌體包括在內(nèi)。這包括噬菌體,如節(jié)桿菌屬、戈登氏菌屬和紅球菌屬。

     

    作為實(shí)現(xiàn)這一激動(dòng)人心目標(biāo)的手段,SEA-PHAGES 團(tuán)隊(duì)將分3 個(gè)階段對(duì)新的放線菌宿主進(jìn)行試驗(yàn),每個(gè)階段都將告知下一個(gè)最終目標(biāo),即建立*佳實(shí)踐以協(xié)助整個(gè) SEA 的噬菌體工作。

     

    SEA-PHAGES 教師可以自愿參與這項(xiàng)工作的任何或所有步驟。各階段描述如下。

     

    單擊此處查看當(dāng)前處于 SEA-PHAGES 管道中的主機(jī)。

     

    第一階段:識(shí)別

    識(shí)別階段是將主機(jī)添加到我們的集合的第一步。此階段的目標(biāo)是確定宿主是否普遍適合課堂噬菌體環(huán)境。這一階段可能由匹茲堡大學(xué)的 Hatfull 實(shí)驗(yàn)室、HHMI SEA-phages 小組或 SEA-PHAGES 計(jì)劃內(nèi)的任何機(jī)構(gòu)進(jìn)行。

     

    您可以通過(guò)選擇要處理的放線菌宿主并確定以下內(nèi)容來(lái)參與此階段:

     

    生長(zhǎng)參數(shù)(培養(yǎng)基、溫度、孵育時(shí)間、菌落形態(tài))

    使用富集發(fā)現(xiàn)噬菌體的頻率

    請(qǐng)注意,處于鑒定階段的宿主可能只是經(jīng)過(guò)初步測(cè)試(即菌落和草坪可以在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng))。因此,這一階段的測(cè)試可能適合獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目。如果您有興趣選擇除試點(diǎn)之外的放線菌宿主,我們建議您使用符合以下標(biāo)準(zhǔn)的宿主。

     

    是一種 BSL1 放線菌

    具有與課堂時(shí)間表兼容的生長(zhǎng)條件

    像草坪一樣容易生長(zhǎng)

    可以分發(fā)給或可供 SEA-PHAGES 社區(qū)使用

    第 2 階段:試點(diǎn)

    當(dāng)宿主已經(jīng)充分表征并確定了獲得斑塊的基本指南時(shí),它們可能會(huì)進(jìn)入試驗(yàn)階段。此階段的目標(biāo)是在許多不同的實(shí)施環(huán)境中測(cè)試主機(jī),并收集有關(guān)在 SEA-PHAGES 教室中使用主機(jī)的大量數(shù)據(jù)。這一階段通常由 SEA-PHAGES 領(lǐng)導(dǎo)層協(xié)調(diào),并涉及在同一學(xué)年在同一主機(jī)上工作的多個(gè)機(jī)構(gòu)。

     

    如果您選擇參與試點(diǎn)階段,您將測(cè)試以下參數(shù):

     

    噬菌體感染(富集、斑塊形成/形態(tài)、緩沖液、滴度、儲(chǔ)存)

    分子生物學(xué)(DNA 提取、限制性分析、測(cè)序、電子顯微鏡)

    第 3 階段:驗(yàn)證

    經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的主機(jī)現(xiàn)已準(zhǔn)備好在 SEA-PHAGES 教室中廣泛使用?;谠囼?yàn)數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)議可用于補(bǔ)充資源指南,協(xié)議發(fā)布在 PhagesDB 上。

     

    主機(jī)選擇指南

    新的 SEA-PHAGES 學(xué)院

    我們強(qiáng)烈鼓勵(lì)所有新加入 SEA-PHAGES 計(jì)劃的教職員工在采用新宿主之前使用 SEA 團(tuán)隊(duì)為您選擇的細(xì)菌宿主成功實(shí)施一年的課程。成功的一年將需要通過(guò)向 GenBank 提交至少一個(gè)帶注釋的基因組來(lái)分離噬菌體。

     

    目前的 SEA-PHAGES 教師

    歡迎以前實(shí)施過(guò) SEA-PHAGES 計(jì)劃的教職員工參與開(kāi)發(fā)新宿主的所有階段。如果您決定測(cè)試新主機(jī),請(qǐng)通過(guò) info@seaphages.org 向 SEA-PHAGES 團(tuán)隊(duì)發(fā)送電子郵件,并附上您選擇的主機(jī)和您打算如何實(shí)施試點(diǎn)的簡(jiǎn)要說(shuō)明(例如在實(shí)驗(yàn)室中或在教室)。

     

    與新主機(jī)合作

    當(dāng)您開(kāi)始使用新宿主時(shí),我們建議您按照資源指南或 PhagesDB 提供的協(xié)議中描述的恥垢分枝桿菌mc 2 155 的說(shuō)明進(jìn)行操作,但有以下關(guān)鍵例外。

     

    首先在 30°C 的 PYCa 培養(yǎng)基中培養(yǎng)新的放線菌。準(zhǔn)備 PYCa 媒體的協(xié)議可以在 PhagesDB 中找到。一旦您熟練使用新宿主,您就可以測(cè)試替代生長(zhǎng)培養(yǎng)基和溫度。

    可以在 PhagesDB 上找到使用新主機(jī)的其他注意事項(xiàng)。

     

    我們要求在新主機(jī)上工作的教職員工保持嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓P記,以便我們能夠快速有效地建立*佳實(shí)踐。與新主機(jī)合作的數(shù)據(jù)將使用 SEA-PHAGES 團(tuán)隊(duì)發(fā)送的在線數(shù)據(jù)收集表收集。您可以在此處查看數(shù)據(jù)收集表,以熟悉將被請(qǐng)求的信息類(lèi)型。

     

    SEA-PHAGES 宿主細(xì)菌的當(dāng)前管道

    恥垢分枝桿菌 mc²155

    已驗(yàn)證| 空中交通管制委員會(huì): 700084

     

    協(xié)議

     

    噬菌體:發(fā)現(xiàn) 11861 個(gè)| 2109 已測(cè)序

     

    球形節(jié)桿菌 B-2979

    已驗(yàn)證

     

    噬菌體:發(fā)現(xiàn) 561個(gè)| 144 測(cè)序

     

    節(jié)桿菌屬 空中交通管制委員會(huì) 21022

    已驗(yàn)證| 空中交通管制委員會(huì): 21022

     

    噬菌體:發(fā)現(xiàn) 707個(gè)| 226 測(cè)序

     

    灰色鏈霉菌 ATCC 10137

    已驗(yàn)證| 空中交通管制委員會(huì): 10137

     

    噬菌體:發(fā)現(xiàn) 444個(gè)| 109 測(cè)序

     

    Gordonia rubripertincta NRRL B-16540

    已驗(yàn)證

     

    噬菌體:發(fā)現(xiàn) 254 個(gè)| 85個(gè)測(cè)序

     

    Gordonia terrae 3612

    已驗(yàn)證| 空中交通管制委員會(huì): 25594

     

    噬菌體:1917 年發(fā)現(xiàn)| 464 已排序

     

    小葉微桿菌 NRRL B-24224

    已驗(yàn)證

     

    噬菌體:發(fā)現(xiàn) 3191個(gè)| 437 已排序

     

    紅球菌 RIA 643

    試點(diǎn)| 空中交通管制委員會(huì): 15903

     

    最初在 ATCC 上列為紅球菌。

     

    噬菌體:發(fā)現(xiàn) 95 個(gè)| 41個(gè)測(cè)序

     

    鏈霉菌 xanthochromogenes NRRL B-5410

    試點(diǎn)

     

    噬菌體:發(fā)現(xiàn) 45 個(gè)| 19 測(cè)序

     

    短桿菌 NRRL B-14687

    試點(diǎn)

     

    噬菌體:發(fā)現(xiàn) 3 個(gè)| 1 個(gè)已排序

     

    綠色發(fā)色鏈霉菌 DSM40736

    鑒別

     

    噬菌體:發(fā)現(xiàn) 27個(gè)| 18個(gè)測(cè)序

     

    葡萄球菌NCIB 9291

    識(shí)別| 空中交通管制委員會(huì): 10234

     

    噬菌體:發(fā)現(xiàn) 13 個(gè)| 8 測(cè)序

     

    副氧化微桿菌 NWU1

    鑒別

     

    被內(nèi)布拉斯加衛(wèi)斯理大學(xué)隔離

     

    噬菌體:發(fā)現(xiàn) 212 個(gè)| 29 測(cè)序

     

     

     

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    其他的這些是菌株

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