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發(fā)布時間： 2023-02-22　　點擊次數(shù)： 934次

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改良Ames試驗

工作原理：在開發(fā)該試驗時，對標(biāo)準(zhǔn)的Ames致突變性試驗進行了修改，以對主要導(dǎo)致石油的致突變性和致癌性的一類化合物，多環(huán)芳香化合物（PAC）提供大的敏感性。使用改良的致突變性試驗對小鼠皮膚繪畫生物測定中已評估的一系列油進行了測試，并通過劑量反應(yīng)的回歸分析對其致突變性反應(yīng)進行了量化。然后將這些分析得出的斜率（稱為致突變指數(shù)或MI）與根據(jù)皮膚繪畫生物測定中的腫瘤反應(yīng)計算的類似致癌性指數(shù)（CI）相關(guān)聯(lián)。由此導(dǎo)出的標(biāo)準(zhǔn)曲線用于建立MI閾值，在該閾值之上，預(yù)計油將在皮膚噴漆試驗中顯示出統(tǒng)計上顯著的致癌活性。由于MI和CI之間的相關(guān)性成立，因為油的致突變性和致癌性在很大程度上（如果不是的話）由PAC介導(dǎo)，因此改良Ames試驗的適用性僅限于含有這些化合物的試驗材料。這一類別包括煉油廠物流，以及使用過的或再精煉過的油、煤焦油和油，以及構(gòu)成部分此類材料的配方產(chǎn)品，前提是配方中不存在干擾測試性能或解釋的成分。

終點：改良Ames試驗的終點是致突變性指數(shù)或MI。它是使用線性回歸分析確定的致突變性劑量反應(yīng)曲線的斜率。對于高度精煉的油，MI可以從零到某些催化裂化原料的大于1200。

MI的解釋：在小鼠皮膚繪畫生物測定中，MI與皮膚致癌潛力的相關(guān)性表明，大多數(shù)MI大于1.0的油是致癌的，而大多數(shù)MI小于1.0的油不是致癌的。后一種規(guī)范的例外是一類被稱為亮漿提取物或殘留芳香提取物的油，要在歐盟認(rèn)證為非致癌物質(zhì)，其MI必須小于0.40。

后勤：我們希望提交用于改良Ames測試的樣本不大于25 ml。確定MI的小樣本量為0.2 ml，但如果將已知體積的油預(yù)先計量到適合使用相對于樣本量五倍體積的DMSO進行提取的容器中，則可從0.05 ml的樣本中獲得有限的數(shù)據(jù)。化驗周轉(zhuǎn)時間取決于工作量，但當(dāng)贊助商要求快速獲得結(jié)果時，我們通?？梢蕴峁┟恐?span>7天的測試和報告服務(wù)，不收取額外費用。測試完成后，以MI的形式將結(jié)果通過電子郵件提供給主辦方。詳細(xì)的書面報告（也通過電子郵件發(fā)送）通常在一兩個月內(nèi)完成，但也可以根據(jù)需要快速提供。報告的紙質(zhì)副本可應(yīng)要求提供。我們歡迎有關(guān)定制報告格式或數(shù)據(jù)分析的咨詢，并很樂意提供關(guān)于修改的Ames測試或其他測試的使用和解釋的教程，作為我們咨詢服務(wù)的一部分。

工作成果：PetroLabs嚴(yán)格按照ASTM方法E 1687 10進行改良Ames試驗。根據(jù)該方案，我們在每次測定中測試參考油（陽性對照）的全劑量范圍，以確保所用S-9制劑的代謝性能在可接受的歷史范圍內(nèi)。我們自豪地為贊助商提供了明確的MI數(shù)據(jù)。如果給定試驗的任何控制參數(shù)超出范圍或致突變性的劑量-反應(yīng)曲線不能很好地擬合（例如，活性材料的R^2<0.90），我們將重復(fù)試驗，無需額外費用。我們按照嚴(yán)格的科學(xué)標(biāo)準(zhǔn)和實驗室實踐進行改良Ames試驗，但我們不遵守良好實驗室實踐（GLP）指南的所有文件和質(zhì)量保證規(guī)定。因此，目前，我們的研究僅用于贊助商信息，如果相關(guān)機構(gòu)要求全遵守GLP，則不適用于監(jiān)管提交。

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