moltox硝化試驗(yàn)

發(fā)布時(shí)間： 2023-03-08　　點(diǎn)擊次數(shù)： 766次

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方法 IP 346

工作原理: 將一定重量的油(通常為4克)溶解在環(huán)己烷中，然后用二甲基亞砜連續(xù)提取兩次。將鹽溶液加入到聯(lián)合的 DMSO 提取物中以沉淀提取的化合物，然后將其反萃取成環(huán)己烷。所得到的溶液經(jīng)過處理以除去水分，然后轉(zhuǎn)移到焦油燒瓶中，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去環(huán)己烷。燒瓶稱重，殘?jiān)闹亓客ㄟ^從最終重量減去焦油重量來確定。得到的值表示為 DMSO- 提取物的重量百分比。終點(diǎn): IP 346檢測(cè)的終點(diǎn)是從測(cè)試材料中提取到 DMSO 中的物質(zhì)的重量百分比。

結(jié)果解釋: 歐盟委員會(huì)已經(jīng)授權(quán)使用方法 IP 346作為標(biāo)記某些石油精煉流的致癌潛力的基礎(chǔ)。這些包括餾分范圍內(nèi)的所有流體 * ，但一般不包括那些來自真空渣油。該標(biāo)準(zhǔn)要求 PAC 含量大于或等于3% (w/w)的油被標(biāo)記為潛在致癌物。* 在使用規(guī)定的蒸餾程序進(jìn)行化驗(yàn)之前，預(yù)計(jì)沸騰溫度低于300攝氏度的大量物質(zhì)的輕流必須“加滿"，PetroLabs 目前沒有提供這項(xiàng)服務(wù)。物流: 參見修改后的 Ames 測(cè)試產(chǎn)品: 我們嚴(yán)格按照石油學(xué)會(huì)出版物中描述的程序執(zhí)行方法 IP 346。

硝化試驗(yàn)

背景: 硝化分析法是一種靈敏的方法，用于定量化石燃料衍生的復(fù)雜混合物、燃燒產(chǎn)物和大量相關(guān)環(huán)境樣品中多環(huán)芳烴(PAC)的相對(duì)含量。該方法依賴于 Ames Test 細(xì)菌菌株 TA98對(duì)硝基 PAC 介導(dǎo)的誘變性的極敏感性，以及許多 PAC 可被化學(xué)硝化的相對(duì)容易性。由于該分析法測(cè)量的是化學(xué)硝化衍生物的致突變效力，而不是母體 PAC 本身，因此不能直接測(cè)量試驗(yàn)材料的潛在致癌性。

工作原理: 程序的第一步是用化學(xué)方法對(duì)試驗(yàn)材料進(jìn)行硝酸鹽化學(xué)處理，通常是將試驗(yàn)材料與80攝氏度的濃硝酸反應(yīng)30分鐘。應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于具有最大生物利益的多氯聯(lián)苯(其中包括 EPA 優(yōu)先污染物)來說，不需要這種苛刻的反應(yīng)條件，因?yàn)槲赐榛洼p度烷化的化合物在室溫下幾乎立即被硝化。這里使用的更嚴(yán)格的處理確保化合物更耐衍生化反應(yīng)，從而提高了該方法的靈敏度。但是，即使在如此嚴(yán)格的反應(yīng)條件下，已經(jīng)表明只有 PAC 被衍生化，這是賦予其近乎絕對(duì)化學(xué)選擇性的方法的一個(gè)特點(diǎn)。硝化反應(yīng)完成后，樣本會(huì)冷卻至室溫，然后用二氯甲烷萃取。一定體積的提取物被移到一個(gè)新的試管中，二氯甲烷被剝離，產(chǎn)生的殘余物重組成二甲基亞砜(DMSO)用于埃姆斯測(cè)試。用于此目的的 Ames 測(cè)試的版本是所謂的“非活化測(cè)定"，這種方法的特征之所以成為可能，是因?yàn)樗褂玫臏y(cè)試菌株(TA98)具有將 nitroPAC 活化為其誘變形式所必需的內(nèi)源性硝基還原酶，使得添加外源代謝混合物(S-9)不必要。該測(cè)試的這個(gè)方面賦予其相對(duì)于 S-9依賴性測(cè)定(如改良 Ames 測(cè)試)的高得多的靈敏度，因?yàn)?span> DNA 加合物種是在細(xì)菌內(nèi)產(chǎn)生的，并且不需要通過細(xì)胞壁運(yùn)輸來達(dá)到其最終的 DNA 靶標(biāo)。此外，硝基芳烴是典型試驗(yàn)材料中可能發(fā)現(xiàn)的唯不依賴于 S-9的誘變劑，這一事實(shí)意味著該方法不僅在化學(xué)上對(duì) PAC 具有選擇性，而且在生物學(xué)上也具有選擇性。

終點(diǎn): 硝化試驗(yàn)的終點(diǎn)直接類似于改良 Ames 試驗(yàn)的終點(diǎn)，即致突變性劑量-反應(yīng)曲線的斜率。在硝化試驗(yàn)中，它被稱為硝化致突變性指數(shù)(NMI)。NMI 的解釋: 如上所述，NMI 并不直接預(yù)測(cè)致癌潛力。相反，它被用來作為比較各種組成相關(guān)的復(fù)雜混合物的相對(duì) PAC 含量的一種手段，與有時(shí)使用 IP 346和其他分析方法的方法非常相似。然而，由于在修改的 Ames 試驗(yàn)和硝化試驗(yàn)中測(cè)量的致突變性與 PAC 濃度直接成比例，因此應(yīng)該可以為具有非常相似的組分分布的煉油廠流體開發(fā)兩個(gè)終點(diǎn)之間的相關(guān)曲線。

用途: 硝化試驗(yàn)適用于任何含有聚合氯化鋁的樣品。對(duì)于樣本容量或 PAC 濃度過低的環(huán)境或生物監(jiān)測(cè)樣品，如改良 Ames 試驗(yàn)和方法 IP 346等標(biāo)準(zhǔn)方法尤其有用。它已成功地應(yīng)用于以下領(lǐng)域: 1。煉油廠流體，金屬加工液，精煉油，燃燒產(chǎn)品的檢驗(yàn)。2.測(cè)試空氣、水和土壤，作為繪制污染物分布圖和監(jiān)測(cè)受污染場(chǎng)地清理作業(yè)效果的一種手段。3.尿中 PAC 代謝產(chǎn)物的生物監(jiān)測(cè)研究。4.PAC 從基質(zhì)(如瀝青)中的可浸出性。5.生物樣品中相對(duì) PAC 含量的測(cè)定。物流: 參見修改后的埃姆斯測(cè)試。工作成果: 我們將與贊助商合作，使研究適合他們的個(gè)人需要。

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