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產(chǎn)品時間:2022-12-09
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能源工業(yè)的微生物檢測分離和測量微生物有一個更好的方法。在冷卻塔中,追蹤細菌不僅僅是微生物的生長——你要追蹤風(fēng)險和測量效率。這些都是能源工業(yè)的基本任務(wù),但它們本質(zhì)上也是無休止的。這是個機會。一種更快、更低成本地分離和測量微生物的方法,將使月復(fù)一月的回報成倍增長。你會節(jié)省時間,節(jié)省金錢,提高成績。無限期的。快速微生物檢測。RAN 生物技術(shù)公司的藝簡單,成本低廉,而且可以在數(shù)小時而不是數(shù)天內(nèi)得到可靠的數(shù)值結(jié)果。我們的兩步手持測試正在改變能源工業(yè)追蹤微生物的方式。你只需要花一點時間自己測試一下。此外,如果需要,可以擴大檢測范圍,以確定檢測到的微生物。

用于單細胞圖解研究的人腸組織的解離和 inDrops 微流體封裝 Alan J Simmons 1,Ken S Lau 2 Affiliations expandPMID: 35880121 PMCID: PMC9307676 DOI: 10.1016/j.xpro.2022.101570 Free PMC article leAbstractIn 基于液滴的單細胞 RNA 測序(scRNA-seq)實驗,將細胞連同其周圍的一些緩沖液和環(huán)境材料封裝成液滴用于 mRNA 捕獲和條形碼。該方案詳細說明了使用冷活性蛋白酶進行人體腸道組織解離的步驟,以及隨后分離單個上皮細胞,通過洗滌富集活力。接下來,描述了在 inDrops scRNA-seq 平臺上封裝的步驟。該方法已被證明適用于息肉、癌癥和發(fā)炎組織。關(guān)于該方案的使用和執(zhí)行的完整細節(jié),請參閱 Chen 等人(2021)。關(guān)鍵詞: RNAseq; 單細胞。2022作者。利益沖突聲明作者聲明沒有相互競爭的利益。

 

環(huán)境研究用于環(huán)境研究的微生物分離和檢測知道水中有什么變得越來越容易。從海洋研究到生物醫(yī)學(xué)再到野生動物研究,環(huán)境研究人員必須盡可能多地了解他們所研究的世界,才能產(chǎn)生新的發(fā)現(xiàn)。微生物的分離和檢測是一個不可少的環(huán)節(jié)。但是傳統(tǒng)的培養(yǎng)皿方法需要幾天才能得到結(jié)果。 RMD 做得更快,更經(jīng)濟,并且具有同樣或更多的準確性??焖傥⑸餀z測的核心創(chuàng)新是一種智能親和色譜法納米材料,可以捕捉和分離樣本中的微生物。結(jié)果是可視的和數(shù)字化的,但測試可以用小型設(shè)備在現(xiàn)場進行。結(jié)果需要幾個小時,甚至幾分鐘。這種轉(zhuǎn)變正在改變研究的方式,你只需要花一點時間親自嘗試一下。

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全球流行的絕大多數(shù)病原體未被發(fā)現(xiàn),影響了病人的護理,阻礙了疫情的準備和反應(yīng)。為了能夠進行常規(guī)監(jiān)測和全面的診斷應(yīng)用,需要能夠擴大測試許多樣品的檢測技術(shù)1,2,3,同時測試許多病原體4,5,6。在這里,我們開發(fā)的組合陣列反應(yīng)多重評價核酸(CARMEN) ,一個可擴展的平臺,多重病原體檢測。在 CARMEN 平臺中,含有基于 CRISPR 的核酸檢測試劑7的納升液滴在微孔陣列中自組織8與擴增的樣品液滴配對,重復(fù)測試每個樣品針對每個 CRISPR RNA (crRNA)。CARMEN  Cas13檢測(CARMEN-Cas13)的組合能夠在單個陣列上對超過4,500 crRNA 靶對進行強有力的檢測。使用 CARMEN-Cas13,我們開發(fā)了一種多重測定法,可以同時區(qū)分至少10個已發(fā)表基因組序列的所有169種人類相關(guān)病毒,并快速加入另外的 crRNA 以檢測20202019冠狀病毒疾病大流行的病原體。CARMEN-Cas13進一步實現(xiàn)了甲型流感病毒株的全面分型和幾十種 HIV 耐藥突變的多重鑒定。CARMEN 的內(nèi)在復(fù)用和吞吐能力使其具有可擴展性,因為小型化使每次測試的試劑成本降低了300多倍??蓴U展的,高度復(fù)用的基于 CRISPR 的核酸檢測將診斷和監(jiān)測工作從高優(yōu)先級樣品的有針對性測試轉(zhuǎn)移到大樣本集的綜合測試,極大地有利于患者和公共衛(wèi)生9,10,11。

主要傳染病是對人類健康和全球安全的一些最大威脅,然而,對于絕大多數(shù)致病微生物,目前還沒有廣泛可用的分子檢測方法,這限制了它們的診斷和監(jiān)測。在許多能夠感染人類的病毒物種中(其中576個已經(jīng)測序,其中169個在201810月之前至少有10個已發(fā)表的基因組12) ,只有39個具有經(jīng) FDA (美國食品和藥物管理局)批準的診斷。雖然已經(jīng)開發(fā)了實驗室開發(fā)的測試,用于在特定設(shè)施對不同的病原體進行臨床測試,但這些測試可能周轉(zhuǎn)時間很長,而且很少復(fù)用。常規(guī)的綜合診斷檢測將提供以前無法獲得的數(shù)據(jù)流,通知患者、醫(yī)護人員和政策制定者抑制和減輕疾病暴發(fā)。然而,由于缺乏可擴展和多路復(fù)用的技術(shù)來快速廉價地鑒定任何循環(huán)病原體,這些工具并不普遍可用(1a)。通過測序或微陣列雜交進行全面的疾病檢測提供了關(guān)于病原體基因型和進化的詳細信息,但由于樣品制備的成本和后勤需求,難以大規(guī)模實施4,5,6,13。快速,低成本的檢測方法,如基于 CRISPR 的方法,基于抗原的檢測,PCR 或環(huán)介導(dǎo)的等溫擴增(LAMP) ,在給定的反應(yīng)中僅檢測一種或少量的病原體1,2,3,7,14,15,16。結(jié)合這些方法的優(yōu)點,一個理想的診斷和監(jiān)測技術(shù)將是高度多元化和容易規(guī)模跨數(shù)百個樣本。

在人類和動物群體中鑒定多種循環(huán)病原體是一個大規(guī)模的檢測問題。CARMEN-Cas13工作流程示意圖。C,寨卡 cDNA 通過具有原子摩爾敏感性的單一 CARMEN-Cas13測定和數(shù)十個重復(fù)液滴對(黑點,重復(fù)數(shù)量為藍色)檢測紅線顯示中位數(shù)并用于構(gòu)建下面的熱圖。頂部,有代表性的水滴圖像。AU 任意單位。

微型化和自組織微流體技術(shù)使生物化學(xué)和細胞分析的大規(guī)模復(fù)用成為可能[17,18,19,20,21]。我們最近開發(fā)了一個微孔陣列系統(tǒng),利用微型化和自我組織進行全面的組合實驗。在這個系統(tǒng)中,用戶準備一組輸入作為液滴乳劑,輸入液滴在陣列的井中組織自己,創(chuàng)建所有可能的成對組合,而不需要額外的用戶努力或主動儀器8。我們設(shè)想基于 CRISPR 的核酸檢測可以與微孔陣列系統(tǒng)相結(jié)合,并行測試多個擴增樣品的多個分析物。

為了實現(xiàn)高度復(fù)用的核酸檢測,我們開發(fā)了 CARMEN (1b,擴展數(shù)據(jù)圖1)CARMEN-Cas13的輸入是通過 PCR 或重組酶聚合酶擴增(RPA) Cas13檢測混合物擴增的樣品,其含有 Cas13,序列特異性 CRISPR RNA (crRNA)和切割報告基因7(擴展數(shù)據(jù)圖1)。每個放大樣品或檢測混合物在傳統(tǒng)的微量滴定板中制備,并與作為光學(xué)標識符的特的基于溶液的熒光色碼結(jié)合。每種顏色編碼的溶液在含氟油中乳化,得到1-nl 的液滴。一旦乳化,來自所有樣品和檢測混合物的液滴匯集到一個單管中,并且ーー在一個移液步驟中ーー裝載到由聚二甲基硅氧烷(PDMS)模制的微孔陣列芯片中(1b,擴展數(shù)據(jù)圖1,2)。陣列中的每個微孔隨機容納來自池的兩個液滴,從而自發(fā)形成液滴化輸入的所有成對組合,并且陣列密封在玻璃基板上以物理隔離每個微孔。通過使用熒光顯微鏡鑒別液滴的顏色代碼來確定每個微孔的含量。暴露在電場中會合并每個微孔中的液滴對,并同時啟動所有的檢測反應(yīng)。熒光顯微鏡用于監(jiān)測每個檢測反應(yīng)(1b,擴展數(shù)據(jù)圖1,2)。

 

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